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水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基

  • 發(fā)布時(shí)間:2017-04-18
  • 發(fā)布者: admin
  • 來源: 本站
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水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基

弧菌是對蝦細(xì)菌性疾病的條件致病菌,一般水體中弧菌數(shù)量取決于養(yǎng)殖環(huán)境的優(yōu)劣,當(dāng)水體中弧菌的數(shù)量達(dá)到一定數(shù)值后就有發(fā)生疾病的危險(xiǎn)。
水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基包括TCBS瓊脂培養(yǎng)基與弧菌顯色培養(yǎng)基
TCBS瓊脂全稱:硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖(TCBS)瓊脂,簡稱TCBS瓊脂。
水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基TCBS瓊脂原 理:
  蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉可刺激弧菌的生長;蔗糖是可發(fā)酵的糖類;膽酸鈉、牛膽粉、硫代硫酸鈉和檸檬酸鈉及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群;霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長;硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵反應(yīng)作為檢測硫化氫產(chǎn)生的指示劑;溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭是pH指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。TCBS瓊脂的原理就是發(fā)現(xiàn)蔗糖發(fā)酵產(chǎn)生酸的菌落,霍亂陽性,副溶血性弧菌陰性。
副溶血性弧菌不發(fā)酵蔗糖,菌落呈藍(lán)綠色。
霍亂弧菌發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸,菌落呈黃色。
溶藻弧菌菌落呈黃色。
霍亂弧菌發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸,菌落呈黃色。然后,這些有機(jī)酸,也被這種細(xì)菌利用,分解成二氧化碳揮發(fā)了,有機(jī)酸沒有了,菌落就重新變成綠色的了。
TCBS培養(yǎng)基中的牛膽粉有抑制其他革蘭氏陽性菌的作用,與枸櫞酸鈉和硫代硫酸鈉合用時(shí),對大腸桿菌有明顯抑制作用。同時(shí)枸櫞酸鈉和枸櫞酸鐵可使霍亂弧菌免受其他抑菌劑的作用,加之有營養(yǎng)豐富的酵母浸粉,霍亂弧菌又能利用蔗糖分解產(chǎn)酸,所以菌落較大,且呈黃色。大腸桿菌等雜菌菌落較小或不生長,故易識別。
黃色菌落只要是利用培養(yǎng)基中的蔗糖產(chǎn)酸,菌落就是黃色的,像溶澡弧菌、河流弧菌、麥?zhǔn)匣【⒌纫九囵B(yǎng)基上均為黃色菌落,并不是黃色菌落就是霍亂弧菌。樣品中常常存在大量可以發(fā)酵蔗糖的干擾細(xì)菌,常常會碰到整個(gè)平板會變黃色的現(xiàn)象。
水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基(TCBS瓊脂)配方(每升):
  酵母膏粉 5g
  蛋白胨 10g
  氯化鈉 10g
  檸檬酸鈉 10g
  硫代硫酸鈉 10g
  膽酸鈉 3g
  牛膽粉 5g
  蔗糖 20g
  檸檬酸鐵 1g
  瓊脂 15g
  溴麝香草酚蘭 0.04g
  麝香草酚蘭 0.04g
  最終pH 8.6±0.2
水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基使用方法:
1、稱取TCBS瓊脂89g,加入蒸餾水或去離子水1 L,加熱攪拌煮沸1—2min溶解后,勿高壓滅菌,冷至50℃左右,傾注滅菌平皿,待凝固后備用。
2、測食品:取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物劃線接種于平板上,36±1℃培養(yǎng)18—24h。
測水樣:取水樣(可稀釋)0.05mL,滴入制好的培養(yǎng)皿培養(yǎng)基上,用滅菌的三角涂布棒將菌液涂抹均勻,平放于操作臺上數(shù)分鐘,使菌液滲入培養(yǎng)基。36±1℃培養(yǎng)。
   選用TCBS作為分離培養(yǎng)各種弧菌的培養(yǎng)基,特異性不是很強(qiáng);不少細(xì)菌在TCBS上也能生長,但生長較慢,需要培養(yǎng)24h后方可長成0.5~1mm的黃、綠色菌落。為有效排除干擾,及時(shí)準(zhǔn)確地判斷出是否存在弧菌屬細(xì)菌,可結(jié)合弧菌屬細(xì)菌在TCBS培養(yǎng)基上生長的特點(diǎn):弧菌生長快,菌落大,培養(yǎng)4-5h原劃線處有菌苔生長,8-10h可長出小菌落,16h菌落可達(dá)2mm;其他菌在TCBS上則無此特點(diǎn)。因此在篩選弧菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)基時(shí)要特別注意在確定的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)進(jìn)行菌落的觀察,時(shí)間超過即影響其準(zhǔn)確性。TCBS培養(yǎng)基篩選的細(xì)菌并非全為弧菌,而且弧菌可能只占很少的一部分,其余大量的是其他種類的細(xì)菌,如大洋芽孢桿菌和芽孢桿菌可以在TCBS培養(yǎng)基上大量生長。
水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 廠家       規(guī)格 貨號 目錄價(jià)
TCBS瓊脂培養(yǎng)基 廣東環(huán)凱   250克 025020 127
TCBS平板培養(yǎng)基 廣東環(huán)凱    20皿/盒 CP0250 110
TCBS瓊脂培養(yǎng)基 北京陸橋   250克 CM402 125
TCBS平板培養(yǎng)基 北京陸橋   20皿/盒 PB023 100
TCBS瓊脂培養(yǎng)基 進(jìn)口OXOID    500克 CM1171B 來電咨詢
弧菌顯色培養(yǎng)基 科瑪嘉       1000ml K06A 1000
我公司供應(yīng)陸橋,環(huán)凱,科瑪嘉,OXOID等多個(gè)知名品牌水產(chǎn)養(yǎng)殖弧菌培養(yǎng)基產(chǎn)品,價(jià)格貨期請來電咨詢。

弧菌顯色培養(yǎng)基

針對副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌的分離和檢測
顯色培養(yǎng)基是以選擇性強(qiáng)、準(zhǔn)確率高而被廣泛應(yīng)用 。它是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測微生物的新型培養(yǎng)基。這些相應(yīng)的顯色底物是由產(chǎn)色基團(tuán)和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色基團(tuán)顯示一定顏色,直接觀察菌落顏色即可對 菌種作出鑒定。 利用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的篩選分離,其反應(yīng)的靈敏度和特異性大大優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)基。在弧菌所相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)把顯色培養(yǎng)基作為分離培養(yǎng)基,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)中的增菌要求充分發(fā)揮顯色培養(yǎng)基 的優(yōu)勢,從而提高弧菌的檢出率。
在科瑪嘉弧菌顯色培養(yǎng)基上,霍亂弧菌呈藍(lán)色、藍(lán)綠色到綠色,副溶血性弧菌呈圓形、半透明、表面光滑的粉紫色;

微生物的典型特征

副溶血性弧菌→紫紅色
創(chuàng)傷弧菌/霍亂弧菌→藍(lán)綠色至翠藍(lán)色
溶藻弧菌→無色
 
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