食品中致病菌LAMP法快速檢測(cè)試劑

SN/T 2754-2011出口食品中致病菌環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)方法試劑盒
 
一、環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法原理 
       環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法，利用兩對(duì)特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu)，引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下（60-65℃）進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑，陰陽(yáng)性結(jié)果顯色差異顯著，擴(kuò)增結(jié)束后可以通過(guò)觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果，無(wú)需開蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。LAMP是一種新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，該技術(shù)無(wú)需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計(jì)要求，只需提供一個(gè)適宜的恒定溫度即可，因此，與常規(guī)PCR相比，LAMP技術(shù)更適合現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)，具有簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。
 
二、應(yīng)用范圍
 
      恒溫?cái)U(kuò)增熒光法檢測(cè)技術(shù)可運(yùn)用于快速檢測(cè)食品中的沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、單核增生李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌O157：H7、阪崎腸桿菌、小腸結(jié)腸耶爾森氏菌、銅綠假單胞菌、糞腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌，溶藻弧菌，創(chuàng)傷弧菌。
應(yīng)用于食品快速檢測(cè)有兩種方式：
1、快速篩查。對(duì)食品樣品快速增菌后，直接采用基因檢測(cè)試劑盒來(lái)快速篩查有沒可疑致病菌（對(duì)大多數(shù)致病菌在13小時(shí)內(nèi)即可完成篩查）；
2、快速鑒定。對(duì)食品樣品進(jìn)行增菌，平板分離，使用基因檢測(cè)試劑盒對(duì)可疑菌落進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒定（1小時(shí)內(nèi)完成鑒定）。

三、食品中致病菌恒溫?cái)U(kuò)增熒光法LAMP法快速檢測(cè)試劑操作流程
      食品或者水樣(過(guò)濾集菌）--液體培養(yǎng)基增菌（8-12h)--取1mL增菌液低速離心收集菌體--裂解菌體釋放DNA，高速離心收集DNA模板--LAMP快速擴(kuò)增--結(jié)果判讀。

四、食品中致病菌恒溫?cái)U(kuò)增熒光法LAMP法快速檢測(cè)試劑相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
SN/T 2754-2011出口食品中致病菌環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)方法系列
第1部分：金黃色葡萄球菌
第2部分：大腸桿菌O157
第3部分：志賀氏菌
第4部分：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特菌
第5部分：副溶血性弧菌；
第6部分：小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌；
第7部分：空腸彎曲菌；
第8部分：肺炎克雷伯氏菌；
第9部分：溶血性鏈球菌；
第10部分：產(chǎn)氣莢膜梭菌；
第11部分：產(chǎn)霍亂毒素的霍亂弧菌；
第12部分：溶藻弧菌；
第13部分：創(chuàng)傷弧菌；
第14部分：假結(jié)核耶爾森氏菌；
第15部分：阪崎腸桿菌。
五、LAMP 試劑品種


 
六、食品中致病菌恒溫?cái)U(kuò)增熒光法LAMP法快速檢測(cè)試劑可能需要的配套試劑

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