單增李斯特顯色培養(yǎng)基
單增李斯特顯色培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱: 單增李斯特顯色培養(yǎng)基產(chǎn)品用途: 單增李斯特顯色培養(yǎng)基用于分離和初步鑒別單增李斯特菌。
檢驗原理
蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;色素與單增李斯特氏菌具有的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán),在平板上,單增李斯特氏菌呈現(xiàn)綠~藍(lán)綠色的光滑規(guī)則的小菌落;抑制劑和配套試劑可抑制雜菌的生長。
單增李斯特顯色培養(yǎng)基配方成分:
配方(每升) 含量
蛋白胨 15.0g
酵母膏粉 5.0g
瓊脂 15.0g
氯化鈉 5.0g
色素 2.3g
抑制劑 5.0g
最終pH 7.1±0.2(25℃)
單增李斯特顯色培養(yǎng)基使用方法:
1. 稱取單增李斯特顯色培養(yǎng)基干粉47.3g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,充分溶解,121℃高壓滅菌15min,冷至50℃左右。
2.取10支配套試劑分別加入1mL無菌水,使之完全溶解。
3.將配套試劑加入到已冷至48℃左右基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻后傾注無菌平皿。
4.按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液,進(jìn)行增菌培養(yǎng)后,用接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種于顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)24-48小時。
5.觀察結(jié)果。致病性李斯特24h后開始出現(xiàn)藍(lán)綠色,至36~48h藍(lán)綠色明顯。挑取顯色平板上呈藍(lán)綠色光滑規(guī)則,直徑約1~2mm的可疑單菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗。
6.對疑似單增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管進(jìn)行下一步的鑒定。
注:如產(chǎn)品類型為干粉,按上述1-6進(jìn)行操作;若為即用型平板,按4-6進(jìn)行操作即可。
單增李斯特顯色培養(yǎng)基質(zhì)量控制
1.外觀方面
干粉基礎(chǔ):流動性良好的淡黃色粉末。配套試劑:淡黃色凍干粉。
制備好平板:淡黃色不透明凝膠。
2.生物學(xué)方面
下列菌株接種單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基后于36±1℃培養(yǎng)24-48h生長情況如下表:"單增李斯特氏菌質(zhì)控圖"
單增李斯特顯色培養(yǎng)基儲存條件及保質(zhì)期:
干粉培養(yǎng)基:2~8℃避光保存,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期兩年。
單增李斯特顯色培養(yǎng)基注意事項:
1、稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。
2、干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。
3、自制平板時需注意培養(yǎng)基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基,平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。
4、即用型成品平板應(yīng)該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產(chǎn)品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正常現(xiàn)象。使用前應(yīng)平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預(yù)干燥。
5、質(zhì)檢報告可以登錄官網(wǎng),打開“客服中心”頁面,輸入產(chǎn)品批號下載。
廢物處理
檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
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