集中空調送風中嗜肺軍團菌檢驗儀器試劑耗材

集中空調送風中嗜肺軍團菌檢驗方法
16.1 G.1 總則
本附錄規(guī)定了用液體沖擊法測定集中空調系統(tǒng)送風中的嗜肺軍團菌。
16.2 G.2 術語和定義
下列術語和定義適用于本方法。
G.2.1
嗜肺軍團菌  legionella pneumophila
樣品經培養(yǎng)在GVPG瓊脂平板上生成典型菌落，并在BCYE瓊脂平板上生長而在L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長，進一步經生化實驗和血清學實驗鑒定確認的菌落。
16.3 G.3 儀器和設備
G.3.1  微生物氣溶膠濃縮器：采樣流量≥100 L/min.，對于直徑3.0μm以上粒子其捕集效率≥80%或濃縮比≥8。
G.3.2 液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器：采樣流量7 L/min-15 L/min.，對于0.5μm粒子的捕集效率≥90%。
G.3.3 離心管：容積50 mL。
G.3.4 平皿：Φ90 mm。
G.3.5  CO2培養(yǎng)箱：35℃～37℃。
G.3.6  紫外燈：波長360 nm±2 nm。
G.3.7  渦旋振蕩器。
G．3.8 普通光學顯微鏡、熒光顯微鏡。
G．3.9 水浴箱。
 
16.4 G.4 試劑和培養(yǎng)基
 
G.4.1  采樣吸收液1-GVPC液體培養(yǎng)基(GVPC液體培養(yǎng)基基礎 貨號026072，規(guī)格250克）
 
G.4.1.1 GVPC添加劑成分：
多粘菌素B硫酸鹽    10 mg
萬古霉素    0.5 mg
放線菌酮    80 mg
 
G.4.1.2   BCYE添加劑成分：
α一酮戊二酸    1．0 g
N-2酰胺基一2胺基乙烷磺酸（ACES）  10.0 g
氫氧化鉀    2. 88 g
L-半胱氨酸鹽酸鹽   0.4 g
焦磷酸鐵    0. 25 g
 
G.4.1.3  吸收液成分：
活性碳    2g
酵母浸出粉    10 g
GVPC添加劑    見G.4.1.1
BCYE添加劑    見G.4.1.2
蒸餾水    1000 mL
G.4.1.4制法：將活性碳、酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高壓滅菌15 min，加入GVPC添加劑（G．4.1.1）和BCYE添加劑（G.4.1.2），分裝于滅菌后的離心管（G.3.3）中備用。
G.4.2  采樣吸收液2-酵母提取液
G.4.2.1  吸收液成分：
 
酵母浸出粉    12 g
蒸餾水    1 000 mL
G.4.2.2制法：將酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高壓滅菌15 min，分裝于滅菌后的離心管（G.3.3）中備用。
 
G.4.3  鹽酸氯化鉀溶液[c（HCI·KCI） =0. 01 mol/L]
G.4.3.1成分：
鹽酸（0.2 mol／L）    3.9 ml_,
氯化鉀（0.2 mol/L）    20 mL
G.4.3.2制法：將上述成分混合，用1mol/L）氫氧化鈉調整pH=2.2±0.2，121℃下高壓滅菌15 min備用。
 
G.4.4  其他試劑
G.4.4.1 GVPC瓊脂平板。
G.4.4.2   BCYE瓊脂平板。
G.4.4.3   BCYE-CYE瓊脂平板。
G.4.4.4 革蘭氏染色液。
G.4.4.5 馬尿酸鹽生化反應管。
G.4.4.6 軍團菌分型血清試劑。

集中空調送風中嗜肺軍團菌檢驗儀器試劑耗材

產品名稱	規(guī)格	說明
耐高溫高壓采樣瓶	500ml	可濕熱滅菌
一次性無菌平皿	90mm	10個/包，500個/箱
GVPC瓊脂平板	20皿/盒	用于選擇性分離、培養(yǎng)軍團菌。
BCYE瓊脂平板	20皿/盒	用于分離、培養(yǎng)軍團菌屬細菌。
BCYE-CYS瓊脂平板	20皿/盒	用于分離、培養(yǎng)軍團菌屬細菌。（不含L-半胱氨酸鹽酸鹽）
采樣吸收液1-GVPC 液體培養(yǎng)基	20ml*18支	用于空調系統(tǒng)中嗜肺軍團菌采樣時吸收液
采樣吸收液2-酵母提取液	20ml*18支	用于空調系統(tǒng)中嗜肺軍團菌采樣時吸收液。
BCYE瓊脂基礎	100g
BCYE生長添加劑	10支/盒
GVPC瓊脂基礎	100g
GVPC添加劑	5支/盒
GVPC液體培養(yǎng)基基礎	250克
GVPC液體培養(yǎng)基配套試劑
采樣吸收液2-酵母提取液	400克	酵母浸出粉
紫外燈（360nm）	360nm	含360nm濾光片200
紫外防護眼鏡		建議觀察熒光實驗使用紫外燈防護眼鏡
3聯(lián)不銹鋼過濾系統(tǒng)	3聯(lián)	含3聯(lián)不銹鋼支架，真空泵，，火焰噴槍
無菌濾膜	200張/400張
二氧化碳培養(yǎng)箱	進口/國產	軍團菌培養(yǎng)
離心機	國產	1000r/min 以上
漩渦混合器	國產	用于混合
軍團菌陽性對照菌株	1支/株	血清型1型
軍團菌生化鑒定套裝	20測試/盒	7種生化管葡萄糖、乳糖、麥芽糖、硝酸鹽（還原）、馬尿素鹽、尿素、明膠、配套試劑各1瓶(茚三酮試劑、硝酸鹽還原試劑甲、乙液)，無菌生理鹽水
軍團菌大套血清	22瓶	22瓶（每瓶1毫升），
軍團菌中套血清	13瓶	13瓶（每瓶2毫升）
軍團菌小套血清	3瓶	包含了最常見的LP1，LP6以及多價血清
嗜肺軍團菌1型診斷血清	1瓶	單支
嗜肺軍團菌多價診斷血清（LP2-LP15）		2-15型有多價也有單支獨立的 。
軍團菌乳膠凝集試劑盒	50測試/盒	用于嗜肺軍團菌血清1型和2~15型的鑒定，可在2分鐘內對選擇性培養(yǎng)基上分離的可疑菌落進行鑒定

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