化妝品實(shí)驗(yàn)室微生物檢測(cè)的注意事項(xiàng)

主要內(nèi)容分為兩大項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)室布局和常見問題的問答。
一.   實(shí)驗(yàn)室布局
關(guān)于化妝品微生物實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)的要求，可以參考GB 50346-2011《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》，其中對(duì)生物安全實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)、分類和技術(shù)指標(biāo)做出了很明確的闡述。
二.   常見問題的問答
①.  問：不同培養(yǎng)基的滅菌條件不一致，是否可以合并成一個(gè)滅菌條件？
答：根據(jù)2015版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》，培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基滅菌條件有三種，如下表1，如果沒有遵從如下滅菌條件，可能會(huì)導(dǎo)致最后的培養(yǎng)結(jié)果有偏離。
表1  每種微生物培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件	微生物種類	培養(yǎng)基名稱	滅菌條件
36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h	菌落總數(shù)Aerobic Bacterial Count	卵磷脂、吐溫80—營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基	121℃高壓滅菌20min
44.5℃±0.5℃培養(yǎng)24h±2h	耐熱大腸菌群Thermotolerant Coliform Bacteria	雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
		伊紅美蘭（EMB）瓊脂	121℃高壓滅菌15min
		蛋白胨水（作靛基質(zhì)試驗(yàn)用）	121℃高壓滅菌15min
36℃±1℃、42℃±1℃	銅綠假單胞菌Pseudomonas Aeruginosa	SCDLP液體培養(yǎng)基	121℃高壓滅菌20min
		十六烷基三甲基溴化銨培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
		乙酰胺培養(yǎng)基	121℃高壓滅菌20min
		綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
		硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
		明膠培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
--	金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus	SCDLP液體培養(yǎng)基	121℃高壓滅菌20min
		營(yíng)養(yǎng)肉湯	121℃高壓滅菌15min
		7.5%的氯化鈉肉湯	121℃高壓滅菌15min
		Baird Parker平板	121℃高壓滅菌15min
		甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基	115℃高壓滅菌20min
28℃±2℃培養(yǎng)5d	霉菌和酵母菌Molds and Yeast Count	虎紅（孟加拉紅）培養(yǎng)基	121℃高壓滅菌20min

②. 問：在實(shí)際工作中，由于一些原因?qū)е挛⑸锱囵B(yǎng)時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間不一致，培養(yǎng)結(jié)果是否可以接受？
答：同樣依據(jù)表1，如果培養(yǎng)時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間不一致，如實(shí)際培養(yǎng)時(shí)間多余或少于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的時(shí)間范圍都會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。因?yàn)橐话愕奈⑸镌谝粋€(gè)相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境中的生長(zhǎng)曲線是“S”形，培養(yǎng)時(shí)間多一些或少一些可能會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有重大影響，別人也無法重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果。
③.   問：微生物培養(yǎng)箱能否放置在接種室？
答：不能。會(huì)有交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)，此外如果接種室是利用臭氧來消毒的話，臭氧會(huì)影響培養(yǎng)箱里面正在培養(yǎng)的微生物。
④.   問：霉菌培養(yǎng)箱、細(xì)菌培養(yǎng)箱能否放置在同一個(gè)房間培養(yǎng)？
答：可以。有條件的話可以分不同的房間。
⑤.   問：霉菌和細(xì)菌是否可以用同一個(gè)培養(yǎng)箱培養(yǎng)？（分時(shí)段單獨(dú)培養(yǎng)）
答：不可以。通過表2就可知，雖然霉菌培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱具備培養(yǎng)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的能力，但是一般的微生物檢測(cè)是細(xì)菌、霉菌和酵母同時(shí)進(jìn)行，如果用同一個(gè)培養(yǎng)箱分時(shí)段單獨(dú)培養(yǎng)很難證明試驗(yàn)結(jié)果的有效性；同時(shí)，企業(yè)的生產(chǎn)一般是連續(xù)的，導(dǎo)致微生物檢驗(yàn)也是連續(xù)的，一個(gè)培養(yǎng)箱也滿足不了實(shí)際質(zhì)控的要求。
表2 三種培養(yǎng)箱的對(duì)比

培養(yǎng)箱種類	適用的微生物	特點(diǎn)
恒溫培養(yǎng)箱	細(xì)菌	溫控范圍：室溫5℃-60℃，只能把溫度穩(wěn)定在室溫以上，不帶制冷，不帶控濕和不帶殺毒功能
霉菌培養(yǎng)箱	細(xì)菌、霉菌、酵母菌	雙制式冷熱控溫，有控濕有用殺毒功能
生化培養(yǎng)箱	細(xì)菌、霉菌、酵母菌	雙制式冷熱控溫，不帶控濕和不帶殺毒功能

⑥.   問：如何對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒？
答：培養(yǎng)箱需要定期消毒。一般的消毒劑為75%的酒精；由于培養(yǎng)箱內(nèi)膽材料一般為不銹鋼，所以不適合用次氯酸鈉或苯扎溴銨，因?yàn)檫@些消毒劑對(duì)不銹鋼有腐蝕性。
⑦.   問：對(duì)于外購(gòu)的培養(yǎng)基，開瓶之后的可以保存多久？
答：對(duì)于外購(gòu)的培養(yǎng)基，開瓶之后的有效期需要經(jīng)過驗(yàn)證才能確定，一般情況下開瓶之后一年內(nèi)都可以使用。
⑧.   問：滅菌后的培養(yǎng)基的可以保存多久？
答：滅菌后的培養(yǎng)基的有效期同樣也需要驗(yàn)證，一般經(jīng)驗(yàn)為冰箱4℃可以保持3個(gè)月，室溫1個(gè)月。用來封口的塞子最好是規(guī)格統(tǒng)一的，不然驗(yàn)證就沒有意義。
⑨.   問：可以使用微波爐來溶解培養(yǎng)基嗎？
答：滅菌后的培養(yǎng)基室溫放置一段時(shí)間后會(huì)凝固，使用前需要溶解，通常采用水浴的方式。使用微波爐也可以，不過需要驗(yàn)證。
⑩.   問：培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的培養(yǎng)皿是正著放置還是倒著？
答：培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的培養(yǎng)皿需倒扣，第一有利于微生物向上吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，第二避免培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水污染微生物。
⑪.  問：什么時(shí)候需要做空白對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照？
答：微生物試驗(yàn)都要求做空白對(duì)照；但是不同的參考標(biāo)準(zhǔn)對(duì)陽(yáng)性對(duì)照規(guī)定不一樣，中國(guó)藥典規(guī)定需要做陽(yáng)性對(duì)照，美國(guó)藥典、歐洲藥典和日本藥典沒有強(qiáng)制規(guī)定。
⑫.   問：一般的微生物檢驗(yàn)室需要生物安全柜嗎？
答：不一定。微生物檢驗(yàn)室的分類及所需的主要設(shè)備，如表3。
表3微生物檢驗(yàn)室的分類及所需的主要設(shè)備

微生物室種類	主要設(shè)備
無菌室	超凈工作臺(tái)（或者隔離器），集菌儀；
微生物限度室	超凈工作臺(tái)（或者隔離器），一般薄膜過濾系統(tǒng)，振搖儀（也可以手動(dòng)振搖不需要配置，根據(jù)企業(yè)情況），混合器；
陽(yáng)性室	生物安全柜，混合器。

⑬.   問：該怎么選擇合適的生物安全柜？
答：對(duì)于實(shí)驗(yàn)室生物安全柜的安裝及使用，在GB 50346-2011《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》中有很詳細(xì)的說明，表4為生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則。為了更多的了解生物安全柜的知識(shí)，可以閱讀JG 170-2005《生物安全柜》和YY 0569-2011《II級(jí)生物安全柜》等資料。
表4生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則

防護(hù)類型	選用生物安全柜類型
保護(hù)人員，一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)生物安全防護(hù)水平	I級(jí)、II級(jí)和III級(jí)
保護(hù)人員，四級(jí)生物安全防護(hù)水平，生物安全柜型	III級(jí)
保護(hù)人員，四級(jí)生物安全防護(hù)水平，正壓服型	II級(jí)
保護(hù)實(shí)驗(yàn)對(duì)象	II級(jí)、帶流層和III級(jí)
少量的、揮發(fā)性的放射和化學(xué)保護(hù)	II級(jí)B1，排風(fēng)到室外的II級(jí)A2
揮發(fā)性的放射和化學(xué)保護(hù)	I級(jí)、II級(jí)B2和III級(jí)

 
原文來源Intertek 天祥集團(tuán)： http://www.intertek.com.cn/news-info_14_1676.html 
廈門敏測(cè)實(shí)驗(yàn)器材公司供應(yīng)化妝品微生物檢測(cè)儀器耗材培養(yǎng)基：http://www.jc6jd.com/anquan/238.html
微生物常見問題問答--節(jié)選自廣東藥檢所2010藥典微生物專題問答http://www.jc6jd.com/anquan/200.html
廣東省藥檢所對(duì)《中國(guó)藥典》2010版微生物專題培訓(xùn)班的有關(guān)問題解答。http://www.jc6jd.com/anquan/198.html